您好,欢迎来到派瑞曼-上海博湖生物科技有限公司商城!
021-5776 3112
发布日期:2024/8/2 10:04:00

      抗体保存得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果!不同的抗体产品保存、运送办法也是不同的,保存是否得当直接影响到抗体的试验作用,选对了保存方法,大部分的抗体活性都能够维持数月乃至数年。下面阐明抗体保存方法!

一、刚收到货时需当即保存
1.请务必在12000rpm离心1分钟后再打开管盖进行分装和保存。
注意:假如抗体体积小于50ul,请延长离心时刻至5分钟,以保证全部抗体均离心下来。
2.绝大多数抗体保存在-20℃是彻底足够了,没有依据显阐明保存在-80℃会有更多好处。
3.防止将抗体保存在自动除霜冰箱中。尽量将抗体保存在冰箱里层,而不是门上。
 
二、抗体的分装要求与保存温度
1.分装能够程度的下降重复冻融对抗体活性的危害,一起也下降了由于屡次从同一管中吸取抗体形成的污染可能性。
2.分装的量以一次试验用完为好,少不能少于10ul每份。由于分装体积越小,抗体的浓度越可能会受到蒸腾以及管壁吸附的影响。 
3.复融后的分装抗体假如一次用不完,将剩下母液保存在4℃,防止再冻起来!
4.抗体工作液应该当天制造当天用完,在4℃尽量不要超过1天。
 
三、抗体的保存注意
1.抗体使用非常特别的贮存管,只要在12000rpm离心1分钟才能将附着在管壁或盖内的抗体全部离心下来。即使是在10000rpm离心也会导致离心不彻底,导致出现抗体的量不足的现象!
 
2.假如抗体很快(1-2周)会使用,引荐在4℃保存,这是为了防止重复冻融对抗体活性的危害。假如要长时间保存则*是在-20℃or-80℃。*要害的一点是要根据阐明书引荐的方法来正确的保存抗体!
 
3.腹水方式的产品请在收到后当即冻起来。由于该类产品含有很多的蛋白酶,长时间在4℃保存会导致抗体的降解。
 

四、为什么抗体保存要4℃?

一般选择4℃运输,避免了反复冻融对抗体活性的损害;如若选择干冰运输,收到抗体是冰冻的,分装时解冻,会增加一次冻融的过程,所以运输过程中尽量避免干冰运输。  
一般情况下,抗体的运送过程需求3-4周的时刻。4℃运送主要的意图是为了防止重复冻融对抗体活性的危害。假如使用干冰运送,那么收到抗体时是冻起来的,为了分装就需求解冻。这就多了一次冻融的过程。所以运送过程中防止干冰运送。

特殊抗体的保存
1、酶联抗体:保存在4℃,避免冻存以降低或丧失酶活性;
2、偶联抗体:需保存在棕色管或是用锡箔纸避光于4℃保存,荧光抗体对光敏感,操作时应严格避光;
3、IgG3的同型对照:保存于4℃避免冻存,反复冻融会导致抗体变性,形成多聚体;
 

抗体保存其他信息
1、加入甘油:对于大多数抗体,可加入50%的甘油来避免反复冻融。甘油在-20℃可降低冰点,但不建议加入甘油的抗体保存于-80℃,该温度已经超过了甘油的冰点;
2、 加蛋白保护剂:蛋白在高浓度时不易降解,正如有些抗体会加入BSA作为稳定剂的原因,同时加入蛋白也可减少抗体由于管壁吸附所造成的损失。但是如果抗体要用来标记的话,则不能加入蛋白稳定剂,因为这些稳定剂会和抗体一起竞争结合标记物。
3、 加入叠氮化Na:为了防止微生物污染,经常选择加入叠氮化Na到抗体中(终浓度 0.02% (w/v))。但在下述情况中不能使用叠氮化Na:
1)、抗体用于染色或处理活细胞,用于体内研究。叠氮化Na在抵抗微生物的同时,对其它大部分有机物也是有毒的,因为它阻断了线粒体的 细胞色素电子传递系统cytochrome electron transportsystem。
2)、 要偶联带有氨基的抗体。叠氮化Na会干扰任何含有氨基的偶联,因此在进行偶联之前,应将叠氮化Na去除。偶联后的抗体可以加入叠氮化Na保存,但是浓度只能是0.01%。对于需要偶联的抗体,硫柳汞 (merthiolate)可以替代叠氮化Na作为保护剂。
此外,如果需要去除叠氮化Na,可以通过凝胶电泳或过滤的方式(IgG 的分子量是 150kDa,叠氮化Na的分子量只有65Da),使用cut off 14kDa的滤膜即可将叠氮化Na从抗体中去除。

上一篇:影响蛋白质沉淀盐析因素解读 下一篇:细胞培养液中应用血清使用注意事项