生化试剂按生物体组织中所含有的或是在代谢过程中所产生的物质可分为氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸、酶、辅酶、糖类、酯类、激素等;按生物学研究的需要可分为电泳试剂、色谱试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂等。
1 .样品信息
样品的溶血、脂血、黄疸等会对测定成果发生非化学反应的干扰。因此,应根据溶血、脂浊、黄疸的光谱吸收特性,采用双波长或多波长的检测形式,并在成果核算中扣除因溶血、脂血、黄疸引起的影响,减少干扰程度。
2 .试剂空白
试剂空白吸光度是反映试剂质量的目标。每种试剂都有必定的空白吸光度规模,试剂空白吸光度的改变往往提示该试剂的变质;有些试剂久置后变浑浊。这些状况均可使空白吸光度升高。往往需要加大用量,才使“表观”吸光度上升,将就过试剂空白核对的“关”,其成果为如下状况:
①线性规模变窄 现象:高值测不高。原因:生产试剂时有效成分投料量缺乏;试剂成份稳定性较差。
② 灵敏度变低现象:酶促反应速度曲线斜率下降,测定成果有严峻系统误差。原因:试剂底物浓度缺乏。
③低值偏高 现象:试剂空白的改变曲线(吸光度VS时刻)显着动摇。原因:试剂自身不稳定,自行分解;东西酶纯度不够,杂酶含量超限,导致干扰效果。
3 .测定规模
每种待测物都有一个可测定的浓度或活性规模,样品成果若超越此规模,分析仪将显示成果超越规模的提示。表明试剂现已变质,应更换合格试剂。
4 .底物耗尽
使用连续监测法、两点法测定酶活性时,若酶活性十分高,底物接近被耗尽,吸光度上升或下降会超越某一吸光度改变规模,监测期的吸光度将偏离线性,使测定成果不可靠。
5 .酶的预活化
测定血清中的某些酶,如CK,离体(采血)后很简单失活。只有通过适当的还原效果才能重新激活。在AST,ALT采用IFCC推荐办法测定时需要磷酸吡哆醛预活化。需要强调:含有活化剂的生化试剂,其测定酶活性的成果要高些。
6 .校准与成果溯源性
酶的校对:要满足在同一办法学、同一测定条件、与理论核算的FACTOR值差异不大,没有发现有显着影响因素,方可进行校对。