【产品名称】
通用名：非结核分枝杆菌核酸检测试剂盒（荧光 PCR 法）
【包装规格】
货号：PR35351
规格：25 人份/盒,50 人份/盒。
【预期用途】
本试剂盒用于非结核分枝杆菌（NTM）核酸的定性检测，用
于非结核分枝杆菌感染的辅助诊断及流行病学监控。
【检测原理】
本试剂盒根据荧光 PCR 技术原理，针对非结核分枝杆菌设
计特异性引物和 Taqman 探针，通过荧光 PCR 检测仪进行检测，
从而实现对非结核分枝杆菌的检测。
【主要组成成分】
【储存条件及有效期】
1．避光-20℃±5℃储存，有效期 12 个月。
2．采用泡沫箱加冰袋的运输方式，运输不超过 4 天；开封后避
光-20±5℃储存；反复冻融不超过 6 次。
3．生产日期、有效期至：见外包装盒。
【适用仪器】
适用于 ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche Lightcycler480I、
Lightcycler480II、cobas Z480、宏石 SLAN-96S、SLAN-96P
等实时荧光定量 PCR 仪。
【样本要求】
1．样本种类：鼻/咽拭子、痰液、支气管肺泡灌洗液；组织培养
物等样品。
2．保存条件：采集的标本应及时送检，24 小时内检测的应 4℃
保存，超过 24 小时的最好-70℃保存（如无-70℃保存条件，
待测样本可于-20℃冰箱保存 10 天），并避免反复冻融。
【检测方法】
1．试剂准备（试剂准备区）
将试剂盒各组分室温融化，充分振荡混匀后瞬时离心。计算
试剂使用份数 N（N=样本数+1<阳性对照>+1<阴性对照>），根据
下表配置反应体系，将各组分加入至同一适当体积离心管中，充
分混匀后瞬时离心，配制成反应体系混合液，按 20μL/孔分装至
PCR 反应管/板，并转移至样本处理区。
2．样本处理（样本处理区）
① 核酸提取
选择合适的核酸提取试剂盒提取样本核酸，具体按照相应的
试剂盒说明书操作。
② 加样
在已加入反应体系混合液的 PCR 反应管/板上分别加入处理
好的待检标本核酸、阴性对照、阳性对照各 5μL，终体积为 25μL。
盖紧管盖或封膜，瞬时离心后置荧光 PCR 扩增仪上检测。
3．扩增检测（核酸扩增区）
*步骤②中 55℃时荧光检测，检测通道为 FAM。
*ABI 系列荧光 PCR 仪不选 ROX 校正，淬灭基团选 None。
4．结果分析
根据分析后图像调节起止值，（建议起始设在 3～15、终止设
在 5～20，同时调整阴性对照的扩增曲线平直或低于阈值线），点
击分析，在报告界面查看结果。
【质量控制】
1．阴性对照：Ct 值＞38 或未检出。
2．阳性对照：扩增曲线呈典型 S 型，且 Ct 值≤35。
3．同一实验以上要求需同时满足，否则本次实验视为无效。
4．每种检测靶标都需设阴阳对照，不同的靶标根据对应阴性调
整基线阈值。
【结果判读】
1．各通道检测靶标。
2．阴性：Ct 值＞38 或未检出。
3．阳性：扩增曲线呈 S 型，且 Ct 值≤35。
4．疑似阳性：扩增曲线呈典型 S 型，且 35＜Ct 值≤38，需复检；
复检结果若一致，判定结果为阳性，若 CT 值＞38 或未检出，
判定结果为阴性。
【检验方法的局限性】
1．样品采集、运输、保存不当，试剂运输、保存、配置不当都
可能会影响实验结果，甚至会导致假阴性结果。
2．如果实验室污染、试剂污染、样品交叉污染，可能出现假阳
性结果。
【试剂盒性能指标】
1．最低检测限：500 copies/mL。
2．特异性：针对可能与检测靶标产生交叉的其他病原无交叉反
应。
【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。
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