本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 96T
2IU/L -90IU/L
使用目的：
本试剂盒用于测定微生物样本中肽基脯氨酰顺式/反式异构酶（PPIase)活性。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中肽基脯氨酰顺式/反式异构酶（PPIase)水平。用纯化的肽基脯氨酰顺式/反式异构酶（PPIase)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肽基脯氨酰顺式/反式异构酶（PPIase)，再与HRP标记的肽基脯氨酰顺式/反式异构酶（PPIase)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肽基脯氨酰顺式/反式异构酶（PPIase)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中肽基脯氨酰顺式/反式异构酶（PPIase)活性浓度。
试剂盒组成
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1 |
30倍浓缩洗涤液 |
20ml×1瓶 |
7 |
终止液 |
6ml×1瓶 |
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2 |
酶标试剂 |
6ml×1瓶 |
8 |
标准品（160IU/L） |
0.5ml×1瓶 |
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3 |
酶标包被板 |
12孔×8条 |
9 |
标准品稀释液 |
1.5ml×1瓶 |
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4 |
样品稀释液 |
6ml×1瓶 |
10 |
说明书 |
1份 |
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5 |
显色剂A液 |
6ml×1瓶 |
11 |
封板膜 |
2张 |
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6 |
显色剂B液 |
6ml×1/瓶 |
12 |
密封袋 |
1个 |
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
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80IU/L |
5号标准品 |
150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
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40IU/L |
4号标准品 |
150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
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20IU/L |
3号标准品 |
150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
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10IU/L |
2号标准品 |
150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
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5IU/L |
1号标准品 |
150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月
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