仅供体外研究使用,不用于临床诊断! 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠戊型肝炎病毒(HEV)抗体(IgG)的含量。
产品名称
小鼠戊型肝炎病毒(HEV)抗体(IgG)ELISA试剂盒
英文名称
Mouse Hepatitis E virus (HEV) antibody(IgG)ELISA Kit
货号
PM103860
试验原理: 小鼠戊型肝炎病毒(HEV)抗体(IgG)ELISA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。
试剂盒组成:
1
20 倍浓缩洗涤液
30ml×1 瓶
7
终止液
6ml×1 瓶
2
酶标试剂
8
标准品(270ng/L)
0.5ml×1 瓶
3
酶标包被板
12 孔×8 条
9
标准品稀释液
1.5ml×1 瓶
4
样品稀释液
10
说明书
1 份
5
显色剂 A 液
11
封板膜
2 张
6
显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1 个
样本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。 2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L
5 号标准品
150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
1200ng/L
4 号标准品
150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
600ng/L
3 号标准品
150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
300ng/L
2 号标准品
150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
150ng/L
1 号标准品
150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
小鼠戊型肝炎病毒(HEV)抗体(IgG)ELISA试剂盒注意事项: 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未 用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好 控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值 大于标准品孔的第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定, 计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 小鼠戊型肝炎病毒(HEV)抗体(IgG)ELISA试剂盒操作步骤 1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔 10 孔,在第一、第二孔中分别加标 准品 100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液 50μl,混匀;然后从第一孔、第二 孔中各取 100μl 分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50μl, 混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl 弃掉,再各取 50μl 分别加到第五、第六孔 中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各 取 50μl 分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl,混 匀后从第七、第八孔中分别取 50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准 品稀释液 50μl,混匀后从第九第十孔中各取 50μl 弃掉。(稀释后各孔加样量都为 50μl, 浓度分别为 180ng/L,120ng/L ,60ng/L,30ng/L, 15ng/L)。 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样 品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样 品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混 匀。 3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。 4. 配液:将 25 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 25 倍稀释后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。 7. 温育:操作同 3。 8. 洗涤:操作同 5。 9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 15 分钟. 10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
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