病毒 DNA/RNA 提取试剂盒(吸附柱法)
【产品名称】
通用名 :病毒 DNA/RNA 提取试剂盒(吸附柱法)
Name :Virus DNA/RNA Extraction Kit(Adsorption column method)
【货 号】P-PR199-50T
【产品介绍】
本试剂盒可从多种样本中提取 DNA/RNA,包括全血、血清、血浆、固体组织和体液等。处理的样 本加入裂解液后,混合物移至吸附柱中,然后以通过洗涤、洗脱即可分离出病毒 DNA/RNA。本试剂盒 提取的核酸可以用于 荧光 PCR,Northern Blot,cDNA library Construction 等实验。
【试剂组成】

【试剂规格】50T/盒。
【储存运输】
室温保存,有效期 12 个月,可室温下运输。
【自备材料和仪器】
灭菌 1.5mL 离心管、各种规格灭菌枪头、离心机(最大转速≥12000rpm)、无水乙醇、漩涡混合器等。
【检测方法】
一、样本前处理
1.对全血、血浆、血清、腹水、唾液、生理盐水或 PBS 处理的拭子上清液等非粘稠液体样品的病毒,可
以直接取 200μL 样品进行核酸提取;
2.对于动、植物组织以及粪便等样品加入适量的生理盐水或 PBS,研磨后充分震荡混匀或直接震荡混匀 (粪便样品),12000rpm 离心 5 分钟,取 200μL 上清进行核酸提取。对于痰液、肺泡灌洗液等粘稠样品, 取 100μL 样品到 1.5mL 离心管中,加入 100μL 痰液液化剂,震荡混匀,37℃温浴 10min,瞬时离心后取 200μL 上清进行核酸提取。
二、试剂准备
试剂盒室温保存,如保存温度过低,应平衡至室温或者温浴,确保各溶液无盐份析出。按照说明书要求在去蛋白漂洗液和洗涤液中加入乙醇。
三、样本提取操作
1.取干净的 1.5mL 离心管,向离心管中加入 200μL 上述处理好的样品(不足 200μL,可以加入 PBS 缓冲 液或者生理盐水补足 200μL),加入 500μL 裂解液,盖上管盖,振荡 30 秒;
2.把上述混合物转移到吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质,以免阻塞 吸附膜),12000rpm 离心 1 分钟,弃去套管中液体;
3.向吸附柱中加入 500μL 去蛋白漂洗液(已按说明书加乙醇),12000rpm 离心 1min,弃去套管中液体;
4.向吸附柱中加入 500μL 洗涤液(已按说明书加乙醇),12000rpm 离心 1min,弃去套管中液体;
5.向吸附柱中加入 500μL 洗涤液(已按说明书加乙醇),12000rpm 离心 1min,弃去套管中液体;
6.把吸附柱放回套管中,12000rpm 离心 2min;
7.把吸附柱转移到新的 1.5mL 离心管,加入 50μL 洗脱液,室温放置 2 分钟;
8.12000rpm 离心 1min,弃去吸附柱,1.5mL 灭菌离心管中液体即为提取的核酸溶液。可以直接用于下游实验,如不立即使用,请保存于-80℃冰箱。
【检测结果的解释】
本试剂盒适用于全血、血浆、血清、腹水、唾液、组织以及粪便等样品。
【注检测方法的局限性】
样品量,液体样品不超过 200μL,固体组织样品需要研磨取上清;灵敏度,使用时需配以高灵敏度 的 PCR 检测试剂和仪器。
【性能指标】
假病毒提取产物(DNA 和 RNA)经高灵敏度的核酸检测试剂确定灵敏度为 10 2 copies/mL,线性范围为 10 3 -10 7 copies/mL。
【注意事项】
1.试剂各成分室温保存,避免形成结晶,如形成结晶,平衡至室温或温浴使结晶溶解;
2.去蛋白酶漂洗液、洗涤液使用前按照说明书要求加入乙醇;
3.提取的核酸立即用于下游实验,如不立即使用,请保存于-80℃冰箱。