公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！
商品属性：
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产品名称
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规格
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货号
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Extreme Thermostable Rnase HII（极耐热Rnase HII）
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200U
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P-PR1372
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描述：该 Rnase HII 是来源于极端耐热的菌株的内源性核
酸内切酶，它识别 RNA/DNA 杂交链并切割 RNA 链，其
对单链 RNA 切割活性极低，且对 dsDNA、ssDNA 无切
割活性。该酶在 DNA/RNA duplex 的单核糖核苷酸残基
处从 5’端进行切割，切割后产生一个 5′ 端磷酸基团和一
个 3′ 端羟基。该 RNase HII 酶在 70-75°C 具有最佳活
性，在 50°C 到 75°C 间均具有活性，但其在室温下活
性非常低（活性降低 ~1000 倍）。该酶极度耐热，在 95°C
加热 15min 后仍保留全部活性，因此其与大多数的 PCR
缓冲体系兼容，可用于 Rnase HII 依赖性 PCR（rhPCR）
等实验。
单位定义：
一个单位是指在 70°C 下，在 10 mM Tris、50 mMNaCl 、0.01% Triton X-100、 10 µg/ml BSA 、4 mMMgCl2 中，每分钟切割 1 nmol 含有单个 rC 的合成DNA/RNA 杂交双链体底物所需的酶量。
应用
减少或去除 PCR 反应中的引物二聚体
提高多重 PCR 产物的准确性
区分异种同源基因
SNP 检测和稀有等位基因检测
储存：-20°C 可保存 3 年。
使用方法
以用于 rhPCR 为例，
1. 配置如下反应体系：
Super Taq DNA Polymerase (5 U/μl) 0.25 μl
10×HG PCR Buffer 1 2.5 μl
dNTP Mixture (2.5 mM each) 2 μl
模板 DNA variable
上游引物（10 μM） 0.5 μl
下游引物（10 μM） 0.5 μl
ET Rnase HII (2U/μl) 0.05-0.2 μl
ddH2O Up to 25 μl
2. 设置 PCR 反应
变性 95°C 2min
30 个循环 95°C 10s
55~60°C 30s
注意事项
1.该酶用于 rhPCR（依赖于 Rnase HII 的 PCR ）时，需要使用 3′ 端带封闭基团的 DNA 引物。
2. 该酶在 50-75℃均有活性，其用量可根据不同的应用进行调节。
3. 该酶与绝大多数的 PCR 缓冲体系兼容，对 mg2+浓度要求也比较宽泛，在 1~6 mM 之间均可发挥活性。
4. 该酶极其耐热，95℃ 15min 活性无显著降低，故不可通过热失活，0.1% SDS 可将其失活。
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