公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！
商品属性：
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产品名称 |
规格 |
货号 |
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南极热敏UDG |
100U |
P-PR1354 |
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南极热敏UDG |
500U |
P-PR1354 |
描述：南极热敏 UDG 是来源于嗜冷海洋细菌经大肠杆菌 表达纯化的的重组蛋白。该酶能有效地水解单链或双链 DNA 上的尿嘧啶，产生的缺嘧啶位点，在高温或高 pH 下，极易水解断裂。该酶对 RNA 无活性，主要用于 PCR 扩增产物的防污染。大肠杆菌来源的尿嘧啶-DNA 糖基化 酶较为耐热，经 95℃10min 处理仍会残留有少量的尿嘧啶 -DNA 糖基化酶活性，导致含有dU碱基的PCR产物的降解。 而来源于嗜冷海洋细菌的热敏型UDG在50℃ 5min即完全 失活，在进行PCR扩增前，在PCR混合液中添加尿嘧啶-DNA 糖基化酶（热敏性），25℃10min 即可消除以往 PCR 产物 的残留污染，由于尿嘧啶-DNA 糖基化酶（热敏性）在 PCR 循环的 94℃变性一步便可被灭活，因此不会影响新的含 dU 的 PCR 产物。
组分
活性定义：在标准反应体系下，37°C 每分钟催化 60 pmol尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量为一个活性单位。
反应 Buffer：
Heatlabile Uracil DNA Glycosylase (UDG)与绝大多数的PCR 聚合酶反应缓冲液都是兼容的，但在高离子浓度(>100mM)下活性会受到抑制。
酶储存液：20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, ,50% Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。
储存：置于-20°C 可保存 2 年，避免反复冻融。
热失活：50°C，10min。
操作方法
1.配制反应体系
Super Taq DNA Polymerase 0.5 μl
dNTP Mixture(2.5 mM each) 2 μl
10XHi PCR Buffer 5 μl
Heatlabile UDG (1U/μl) 1 μl
Primers (10μM each ) 1 μl
Template DNA 10ng-1 μg
DEPC-treated Water up to 50 μl
2. 25℃孵育 10min。
3. 正常启动 PCR 程序。
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