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商品属性:
产品名称
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规格
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货号
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UNG (Uracil N-Glycosylase)
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1000U
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P-PR1353
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UNG (Uracil N-Glycosylase)
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5000U
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P-PR1353
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描述:尿嘧啶 DNA 糖基酶(Uracil N-Glycosylase,UNG)
又名 Uracil-DNA Glycosylase, UDG, 来源于 E. coli
uracil N-glycosylase 基因的重组表达,分子量为 26kDa。
其可催化含尿嘧啶的单链和双链 DNA 释放游离尿嘧啶。
它对 RNA 无活性,主要应用于 PCR 扩增产物的防污染。
它的作用原理基于:如果在 PCR 反应中以 dUTP 替代
dTTP掺入DNA 中,形成了含 dU 碱基的 PCR 扩增产物,
该酶能选择性断裂单链和双链 DNA 中 U 基的糖苷键,降
解该 PCR 扩增产物。
组分
活性定义:在标准 PCR 反应体系下,37℃条件下,1 小时降解 1µg 含 dU 碱基的单链 DNA 的酶量为 1 活性单位。
反应 Buffer:
UNG与绝大多数的PCR 聚合酶反应缓冲液都是兼容的,但在高离子浓度(>100mM)下活性会受到抑制。
酶储存液:20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, , 50%
Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。
储存:置于-20°C 可保存 2 年,避免反复冻融。
热失活:95°C,5min。
操作方法
1.配制反应体系
Super Taq DNA Polymerase 0.5 μl
dNTP/dUTP Mixture 2~4 μl
10XHi PCR Buffer 5 μl
Uracil N-Glycosylase (5U/μl) 0.2~0.5 μl
Primers (10μM each ) 1 μl
Template DNA 10 ng-1 μg
DEPC-treated Water up to 50 μl
2. PCR 扩增循环参数