血镁浓度检测试剂盒说明书
微量法 100T/96S
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
镁是多种酶的激活剂,如磷酸酶、肌酸激酶、己糖激酶和羧化酶等。镁也是组成DNA、RNA及核糖体大分子结构所必需的元素。镁是维持正常神经和肌肉功能的重要元素。血清镁浓度偏离正常值,与某些肾脏和内分泌疾病等相关。
测定原理:
镁离子在碱性介质中氢氧化成胶体粒子,进一步与达旦黄结合后呈橘红色,在一定范围内,540nm吸光度与镁离子浓度成正比。
自备仪器和样品:
可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
试剂组成和配置:
试剂一:液体2mL×1管,4℃保存。
试剂二:液体2mL×1管,4℃保存。
试剂三:液体5mL×1瓶,4℃保存。
标准液:液体1mL×1管,0.2 mmol/L镁标准液,4℃保存。
测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到540 nm,蒸馏水调零。
2. 空白管:取EP管,加入120μL蒸馏水,20μL试剂一,混匀;进入20μL试剂二,混匀;加入40μL试剂三,混匀。静置5min后于540nm测定吸光度,记为A空白管。
3. 标准管:取EP管,加入10μL标准液,110μL蒸馏水,20μL试剂一,混匀;进入20μL试剂二,混匀;加入40μL试剂三,混匀。静置5min后于540 nm测定吸光度,记为A标准管。
4. 测定管:加入10μL血清,110μL蒸馏水,20μL试剂一,混匀;进入20μL试剂二,混匀;加入40μL试剂三,混匀。静置5min后于540 nm测定吸光度,记为A测定管。
注意:空白管和标准管只需测定一次。
血镁浓度计算:
血镁含量(mmol/dL)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V样总
=0.02×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标准液:0.2 mmol/L;V样总:样品总体积,1 dL=0.1 L。
注意事项:
1. 该试剂盒使用过程中,应尽量避免光照射;
2. 血液采取过程中,宜空腹采血,避免使用枸橼酸钠抗凝剂;
3. 红细胞内镁含量约为血清含量的3倍,应避免溶血,并及早将血清分离。
4. 加入试剂三混匀后应该在30 min内测定吸光度。
5. 最低检出限为0.1mmol/L。
血镁浓度检测试剂盒说明书试剂一:取2 mL EP管,加入2mg聚乙烯醇,溶解于2 mL50℃蒸馏水。
试剂二:取2 mL棕色EP管,加入0.4 mg达旦黄,加2 mL蒸馏水充分溶解。
试剂三:取5 mL试剂瓶,加入0.375 g NaOH,加入5mL蒸馏水溶解。
标准液:称取1 mg MgSO4•7H2O,加蒸馏水4.057 mL充分溶解;取EP管,加入0.2 mL上述溶液,0.8 mL蒸馏水,混匀,即为0.2 mmol/L镁标准液。